دراسات كيميائية حيوية على بعض المنتجــات الطبيعية المفصـولة من قشــور البرتقال

                                                 "الملخـــص العربى

    شغلت صناعة استخلاص الأدوية من النباتات جزء كبير من أساليب العناية بالصحة في مختلف أنحاء العالم على مدار آلاف السنين وهناك اهتمام متزايد بالنباتات كمصدر لعلاج الأمراض الميكروبية.

 ◄تحتوى الكثير من النباتات على العديد من المركبات البيولوجية الفعالة والتى لها خواص مضادة للميكروبات، وقد استخدمت العديد من الفصائل النباتية كأسلوب لعلاج بعض الأمراض المعدية وذلك لاحتوائها على خصائص مطهرة وقاتلة للبكتريا.

◄ تم عمل المسـح الفيتو كيميــائى لعشرة أنواع مختلفة من النباتات       ( جذع الكرنب ,أزهار الكاموميل ، مخـلف الباذنجان، قشر البرتقال البلدي،مصاصات قصب السكر, بذور الترمس،عشب عنب الديب، قشر الباذنجان ،جذور العرق ســوس وأوراق وإزهار الشــيح الخــرسانى)،     و قد تم اختيار أربعة أنواع فقط و هى قشر البرتقال البلدي،مصاصات قصب السكر, بذور الترمس و  عشب عنب الديب وذلك لأنها تحتوى على بعض المكونات الأكثر فاعلية.

 ◄من النتائج يتضح لنا أن مسحوق قشر البرتقال له أعلى فاعلية كمضاد للنشاط البكتيري والخميرة و ذلك أثناء مراحل النمو المختلفة.

◄ يعتبر البرتقال من أهم المحاصيل المصرية حيث يعادل إنتاجها ما يقرب من 2% من إجمالي إنتاج العالم.

◄  تم استخلاص مسحوق قشور البرتقال بالتتابع بالماء البارد والساخن والكحول الإيثيلى المركز بنسبة 95%  و 50% وأيضا بالكلوروفورم  و الإيثر، وقد وجد ان مستخلص الماء البارد هو الأكثر فاعلية ضد النشاط الميكروبي للسلالات البكتيرية والخميرة. وكذلك فإن المستخلص المائى يعطى أعلى عائد حيث أن كل 100 جرام من مســحوق البرتقال يعطى 23 جرام مســتخلص جاف. و قد وجــد أيضاً أن المســتخلص المائى يحتــوى على مواد كربوهيدراتية ،سـكريات مختزلة، مواد فلافونودية، مــواد دباغيــة، مـــواد قاعــدية و مـــواد كومــارينيــة.

دراسات على مسحوق قشر البرتقال:

◄ وجد إن نسبة البروتين لقشور البرتقال تقدر بحوالي 5.8%.          وباستخدام طريقتا الفصل على هلام الأجــاروز و الفصل على هلام بولى أكريلامــيد  (SDS) لبروتين قشور البرتقال،فأعطتا حزمــة و حزمتان على التــوالى.

◄ أوضحت النتائج أن مسحوق قشور البرتقال يحتوي على 16 حمض أميني و أن قشور البرتقال تحــتوى على أحماض أمينيه أساسية وشبه أساسية وغير أساسية. ولا تحتوي على أحماض أمينيــة كبريتــية مثل السيستين و السيستيك.

◄ و قد تم تقــدير التركيز لعديدى الفينولات للمستخلص المائي وذلك بإستخــدام كلا من الروتين و حمض الجاليك و الكاتيكول كمــواد قيــاسية وقد قدرت بحوالى 792,4 و  438  و  218,9 مليجرام/100مجم على التوالي.

◄تحـتوى قشور البرتقال على نســبة عالية من الأليــاف الغذائيــة قدرت بحوالى (55%) و أيضــاً على كمية من الأليــاف القابلة للذوبان بنسبة (15%).

◄ نسبة احتواء البرتقال على البكتين قدرت بحوالي 157 مليجرام لكل جــرام من المسحوق الجاف.

◄ يحتوى قشر البرتقال على نسبة عالية من الكالسيوم و البوتاسيوم وكمية ضئيلة من الحديد و الزنك بينما لا يحتوى على عناصر مثل الكادمــيوم و الكروم  و االرصاص.

◄ تم دراسة المستخلص الكحولي من مسحوق البرتقال البلدي و ذلك عن طريق تقنية (الكروماتوجرافي) ذات الورقة ثنائية الأبعاد و تسجيل أطياف الأشعة الفوق البنفسجية مباشرة  على الورق , و قد اتضح لنا أن المستخلص الكحولى من مسحوق قشر البرتقال يحتوى على كومارين ، تربيــنات، فلافينويدات و فلافينويدات عــديدة الميــثيل.

◄ تم تجزئة المستخلص المائى باستخدام عمود جيل السيليكا بمذيبات مختلفة لإنتاج أربعة أجزاء(I, II, III, IV )   و بالتحليل الفيتوكيميائى لهذه الأجزاء ظهر أن الأجزاء(I-III)   تحتوى على المكونات الأكثر فاعلية، بينما يحتوى الجزء الرابع على مقدار ضئيل من الفلافينودات              و الســتيرولات و البروتينات. 

◄ أظهرت النتائج أن أجزاء I و II لها اعلي فاعلية ضد الميكروبات         وخاصة ضد خمائر كانديدا ألبيكــانس، تروبيكالس و بكتريا باسيلس ساتلاس, بينما لها فاعلية متوسطة ضد الفطريات و خاصة الترناريا سولانى و فيوساريم سولانى.

◄ وبدراسة تأثير الحرارة مع الزمن على النشاط الميكروبى لكل من مستخلصات الماء البارد و الساخن و أجــزاء عمود جيل السيليكا         (I, II, III, IV )   و كذلك البكتين ضد الميكروبات و قد أظهرت النتائج أنه لايوجد تغير ملموس على الفاعلية ضد الميكروبات. 

◄ وبدراسة  تأثير الأس الهــيدروجني على نشاط مستخلصات الماء البارد            و الساخن ضد الميكروبات, وعلى أجزاء عمود جيل السيايكا و على البكتين ،اتضح ان افضل قيم للأس الهيــدروجينى و التي أظهرت عندها اعلي نشاط ضد الميكروبات هى 6,5 و7.

◄ وقد تم تجزئة أجــزاء عمود جيل السيايكا   (I-III)باستخدام عمود        السيفاديكس LH-20 وباستخدام الماء والكحول الإيثيلى كمذيبات لإنتاج من كل جزء إلى جزيئين أخريين وهى ( IW,IE, IIW,IIE, IIIW,IIIE ).

◄ وبالتحليل الفيتوكيميائى للجزئيين (IE , IIE ) وجدا إنهما يحتويا على نسبة عالية من الفلافونيدات و قــد أظهرت النتــائج بأنهما أكثر الأجزاء نقاء و الأكثر فاعلية ضد الميكروبات.

◄أظهر الجزئيين (IE , IIE) فاعلية كبــيرة ضــد نمـو كانديدا ألبيكــانس حيث أن أقل تركــيز مثبط للنمــو يسـاوى 130 ميكــروجرام / ملليليتر .

◄ تم التعرف على بعض المواد الفلافــونودية الموجـودة فى قـشور البرتقال باستخدام جــهاز كروماتوجرافيا الأداء العالى للسوائل و بالمقــارنة بعينـات قيــاسية، وجد أن قــشور البرتقال تحتوى على نســبة عالية من الهيسبيريدين حيث يصل التــركيز إلى 65 مليجرام لكل 100جــرام  و يتبعــه النارينجين و النـارينجــنين حيث يصل التركيز إلى 45 و 15 مليجرام لكل 100جــرام على التــوالى. أما بالنســبة للفلافــونويدات عديدة الميثيــل فقد وجد أن التـانجريتن و تترا –او – ميثيل ســكتلارين تركيزهما يصل إلى 2,25 و 2 مليجرام لكل 100جــرام على التــوالى      و يتبعــه النوبليتين و السيننستين حيث يصل التركــيز الى 1,25 و 8,. مليجرام لكل 100جــرام على التــوالى.

◄الدراســات البيولوجــية:

   1- إخــتبار السمية على يرقــات الجمــبرى:

    وجــد أن كل من المستخلص المائى و كذلك الأجــزاء المفصولة ليس لهم أى ســمية حيث أن التركيز الذى يسبب إماتة نصف يرقات الجمبرى أكثر من واحد جرام لكل مل.

2- إختــبار الفاعلية ضد الحــشرات:

  أظهرت الخلاصة المائية لقشــور البرتقال أقوى فاعلية ضــد ذبابة الفاكهة حيث أن نسبة الإماتة تصل إلى 66% و ذلك عند تركيز         30 ملجرام لكل 100مل.أمــا بالنسبة للأجزاء الثلاثة المفصــولة من عمــود جيل السليكا فقد وجــد أن نســبة الإماتة تصل إلى 50 و 33,3  و30% على التــوالى.

3- الفاعلية المضــادة للأكســـدة:

  أظهــرت الأجــزاء المفــصولة من عمــود الـسيفاديكــس LH-20             ( IE , IIE )أقوى فاعلية كمضــادات للأكــسدة بينمــا يعتبــر الجــزء الرابع المفصــول من عمــود جيل السيليكا الأقل فــاعلية.

◄ وقد وجد ان الأجــزاء المفــصولة من عمــود الـسيفاديكــس LH-20 (IE - IIIE )  تنتمى إلى نوع الفلافونــون.

◄ تم التعرف على مــكونات الجزئيين المفــصولين من عمود الـسيفاديكـس LH-20 ،  ( IE , IIE )وذلك عن طريق الفصل على شـرائح رقيقة من  البولى أميد و باستعمال خليط من البيوتانول و حمض الخليك   و الماء بنســبة 5:1:4 كمذيب للفصل و بدراسة الشرائح وجــد أن الجزئيين المفصولين )   ( IE , IIEيتكونا من 4 و 6 طبقـــات على التوالى وقد تم التعرف عليها بإســتخدام الأشــعة فــوق البنفسجيــة عند 365 نانوميتر قـــبل و بعد تعرضــها لأبخرة النشادر.

◄ تم التعرف على المركبات الفلافــونوديــة الذى يتكون منها كلا من    ( IE , IIE ) وذلك عــند طريق معرفــة الوزن الجــزيئى لكل طبقة و ذلك بعد تنقـيتهـا بـواسطة عمــود الـسيفاديكــس LH-20 و باستخدام الكحــول المثيلى بنسبــة 80% .    

◄ وقــد تم تقــدير الوزن الجــزيئى بواسـطة عمــود الـسيفاديكـس G-25             و باستخدام الأسيتون المائى بنسبــة50%  و لزيادة التــأكد من كــونية بعض المركـبات تم عمل قيـاسات طيفية أخرى مثل طيف الكـتلة و طيف الرنين المغناطيسى و تعيين درجة الإنصهــار. فقد تم التعرف على بعض المركبات الفلافــونودية وهى الديدامين و النارينجين و النــارينجــينين   و الهيسبيريدين و التـانجريتن و تترا –او – ميثيل ســكتلارين          و نوبليتين و سيننستين .

◄ من خــلال هذا البحــث تم تحقيق أهــداف عــديدة ،منها اســتخلاص و تنقــية لبعض المــواد الفعالة و التى لهــا فوائد طبــية عظيمــة و ذلك بطرق بسيطــة و غير مكلفة. و باستخدام قشــور البرتقال و الذى يعتــبر من المخلفات الصناعيــة و بذلك نســاهم فى التخلص من إحدى مــلوثات البيئــــة."