الانتخاب بمساعدة الأدلة الوراثية للإجهاد الملحي وصفات الجودة في الذرة السكرية

    "الأنتخاب بمساعدة الأدلة الوراثية للإجهاد الملحى وصفات الجودة فى الذرة السكرية

 أجريت هذه الدراسة في المزرعة الحقلية و صوبة ومعامل قسم الوراثة - كلية الزراعة جامعة عين شمس-شبرا الخيمة ومعمل التكنولوجية الحيوية بقسم الوقاية (الأمراض والآفات) - معهد بحوث المحاصيل السكرية - مركز البحوث الزراعية خلال الفترة من 1999-2005 وكان الهدف من هذه الدراسة هو دراسة الأساس الوراثى والجزيئى لتحمل الملوحة فى بعض الأصناف المنزرعة من الذرة السكرية وذلك بأستخدام تقنية RAPD-PCR  وتقنية SSR-PCR.

ويمكن تلخيص النتائج المتحصل عليها كمايلي:

1-      تم زراعة أحدى عشر صنفاً من الأصناف المنزرعة من الذرة السكرية لأختبار درجة تحملها للملوحة عن طريق دراسة بعض الصفات المحصولية المتعلقة بتحمل الملوحة وهى صفات: طول النبات والطول الكلى للجذور والوزن الغض للمجموع الخضرى والوزن الجاف للمجموع الخضرى والوزن الجاف للمجموع الجذرى والنسبة المئوية للكلوروفيل الكلى ونسبة المجموع الخضرى/المجموع الجذرى.

2-      بناء على نتائج التجربة السابقة, تم أختيار الصنف أطلس Atlas كصنف حساس للملوحة والصنف ركس Rex  كصنف متحمل للملوحة, ثم تم إجراء التهجين بينهما للحصول على الجيل الأول ثم عمل التلقيح الذاتى للجيل الأول للحصول على حبوب الجيل الثانى.

3-      تم أختبار الصنفان أطلس وركس الجيل الأول والجيل الثانى فى مزرعة رملية وعرضت للإجهاد الملحى (6000 جزء فى المليون) وأخذت البيانات الحقلية بعد 72 يوم من الإنبات للصفات السابق ذكرها.

4-      تم تقسيم نباتات الجيل الثانى إلى مجموعات بناءاً على نموها تحت ظروف الإجهاد الملحى بحيث تضمنت المجموعة الأولى النباتات عالية التحمل للملوحة والمجموعة الأخيرة النباتات عالية الحساسية للملوحة.

5-      تم أختبار مستخلص DNA للطرز الوراثية لكلاً من الأبوين المتضادين ونباتات الجيل الأول ونباتات الجيل الثانى (مجموعة النباتات المتحملة ومجموعة النباتات الحساسة للملوحة وذلك بأستخدام:

أ) تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل (RAPD-PCR) مع 20 بادئ عشوائى من خلال أختبار تحليل ضم الأنعزالات المتفارقة Bulked segregant analysis  وقد أظهرت عشرة بادئات وهم OP-A0l, A02, OP-A03, OP-A04, OP-A05, OP-A6, OP-A07, OP-A09, OP-B02 , OP-B04 النتائج التالية:

1-      البادئات OP-A01, OP-A03  أظهرت خمس حزم مميزة وهى 1258 bp, 1007 bp, 351 bp, 278 bp , 223 bp على الترتيب فى الأب المتحمل وفى مجموعة نباتات الجيل الأول وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى المتحملة فى حين غابت هذه الحزم فى الأب الحساس وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى الحساسة وبذلك يمكن أعتبارها من الكشافات الجزيئية المرتبطة موجباً بتحمل الملوحة فى الذرة السكرية.

2-      البادئات OP-A02, OP-A03 , OP-A06   أظهرت ثلاث حزم مميزة وهى 793 bp, 116 bp 1284 bp, على الترتيب فى الأب الحساس وفى مجموعة نباتات الجيل الأول وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى الحساسة فى حين غابت هذه الحزم فى الأب المتحمل وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى المتحملة وبذلك يمكن أعتبارها من الكشافات الجزيئية المرتبطة سالباً بتحمل الملوحة فى الذرة السكرية.

ب)      تقنية تكرارات القواعد المنتشرة داخل الجينوم (SSR-PCR) حيث تم أستخدام عدد خمسة عشر زوج من البادئات المتخصصة للسورجم ثمانية بادئات منها وهى Xtxp01, Xtxp04, Xtxp06, Xtxp08, Xtxp10, Xtxp12, Xtxp17 , Xtxp19 أعطت النتائج التالية:

1)      البادئات  Xtxp04 و Xtxp19أظهرت حزمتين مميزتين وهى 206 bp, 173 bp على الترتيب فى الأب المتحمل وفى مجموعة نباتات الجيل الأول وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى المتحملة فى حين غابت هذه الحزم فى الأب الحساس وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى الحساسة وبذلك يمكن أعتبارها من الكشافات الجزيئية المرتبطة موجباً بتحمل الملوحة فى الذرة السكرية.

2)      البادئات Xtxp17, Xtxp04   أظهرت حزمتين مميزتين وهى  164 bp, 128 bp على الترتيب فى الأب الحساس وفى مجموعة نباتات الجيل الأول وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى الحساسة فى حين غابت هذه الحزم فى الأب المتحمل وفى مجموعة نباتات الجيل الثانى المتحملة وبذلك يمكن أعتبارها من الكشافات الجزيئية المرتبطة سالباً بتحمل الملوحة فى الذرة السكرية.

3)      تم تأكيد النتائج المتحصل عليها من أختبار تحليل ضم الأنعزالات المتفارقة Bulked segregant analysis بأستخدام تقنية تكرارات القواعد المنتشرة داخل الجينوم (SSR-PCR) وذلك بتحليل نباتات الجيل الثانى كل على حدا. ويمكن تلخيص النتائج فى الآتى:

أ- البادئ Xtxp04  يمكن أعتباره بصورة مؤكدة من الكشافات الجزيئية المرتبطة بالملوحة فى الذرة السكرية

ب-      البادئ Xtxp19 لا يمكن أعتباره من الكشافات الجزيئية المرتبطة بالملوحة فى الذرة السكرية رغم وضوح ذلك فى أختبار تحليل ضم الأنعزالات المتفارقة Bulked segregant analysis بأستخدام تقنية تكرارات القواعد المنتشرة داخل الجينوم (SSR-PCR)

مما سبق يمكن أستخدام الكشافات الجزيئية السابقة فى المساعدة على أنتخاب أصناف من الذرة السكرية متحملة للملوحة بطريقة دقيقة وسريعة حيث أنها تعتمد على أنتخاب تراكيب وراثية وليس على الصفات المورفولوجية التى تتأثر بالتغيرات البيئية المختلفة."