دراسات التصنيف الكميائى على النيتراريايتوزا و بعض التصنيفية المختارة من الفصيلة الزيجوفيلية

   "وتهدف الدراسه الى:

 

- جمع عينات نباتية مختلفة لنبات(الغردق) Nitraria retusa والأنواع المختارة من الفصيلة الزيجوفيلية من اماكن تواجدها المختلفة وايداع عينات نباتية بمعشبة المركز القومى للبحوث (CAIRC) ومعشبة كلية العلوم -  بجامعة عين شمس (CAIA).

- إجراء دراسات مورفولوجية وتشريحية للوحدات المختارة بالطرق التقليدية المتعارف عليها في علم التصنيف ووضع هذة النتائج في جداول ولوحات مجمعة مع استخدام المجهر الضوئى والاليكترونى الماسح LM & SEM. 

- دراسة المحتوى الكيميائي للوحدات المختارة وبالتحديد فصل وتعريف المحتوى الفلافونيدي لنبات Nitraria retusa عن طريق طرق التحليل الكيميائى والفيزيائي المتعارف عليها ومقارنتة بما تحتوية باقى النباتات قيد البحث باستخدام التحليل الكروماتوجرافى العالى فى السوائل(HPLC).

- مقارنة نتائج البحث مع النتائج السابقة لاخرين لتحديد العلاقات التطورية بين الوحدات المدروسة من خلال الصفات المورفولوجية والتشريحية والكيميائية.

 - استخلاص كافة الخصائص الظاهرية والتشريحية وخصائص البذور والمحتوى الفلافونيدى للنباتات قيد الدراسة وتجميع هذة الخصائص وترتيبها فى جداول واخضاعها لبرنامج التحليل الاحصائى(Minitab Inc, 1999)  لمعرفة درجة التشابهات والاختلافات بين تلك الانواع.

 

 

وقد خلصت الرسالة الى مجموعات من الدلائل التشخيصية الهامة نلخصها فيما يلى :

 

أولا: الدراسة النباتية

 

1-   دراسة الشكل الظاهرى

 

يتضمن هذا الجزء تجميع العينات من البيئات المختلفة في حالة غضه  وكذلك  دراسة وتسجيل الصفات الشكلية الظاهرية لكل من الأجزاء الخضرية والأجزاء الزهرية والتكاثرية من العينات المجمعة مباشرة وايضا بعد حفظها ووضعها فى صورة عينات معشبية. وكذا وصف البذور باستخدام كلا من المجهر الضوئى والمجهر الالكترونى الماسح للوقوف على تفاصيل دقيقة لسطح البذرة.

وقد لوحظ وجود تباين فى الشكل الظاهرى للعينات المدروسة ووجد أن لها اهمية تشخيصية للفصل بين الوحدات المدروسة حيث تميزت Nitraria retusa بانها شجيرات شوكية واوراقها بسيطة  ومسننة القمة ، الازهار مقنبة والثمار حسلية وتؤكل. وعند دراسة السطح الخارجى للبذرة بواسطة المجهر الالكترونى الماسح وجد ان بذور Nitraria retusa تحتوى على طبقة شمعية على الطبقة الفوق كيتية. وقد توافق هذا مع ما ورد ذكرة فى دراسات سابقة بواسطة

, Bolous(2000) (1974)Takhtajan (1959), Täckholm

 

2- الدراسة التشريحية

 

فى هذا الجزء تمت دراسة التركيب التشريحي لكلا من السوق والأعناق والأنصال والأزهار وتم وضع جميع النتائج فى جداول مجمعة لعمل تحليل احصائى لها. وقد توافقت الخصائص التشريحية لكلا من السوق والأعناق والأنصال مع ما تم ذكرة من قبل بواسطة

.(Metcalfe & Chalk, 1950 and Watson & Dallwitz, 1992)

 

وقد دلت الصفات التشريحية للسوق والازهار على أهميتها التشخيصية للفصل بين الوحدات المدروسة. وقد استخلص من تلك الصفات انة يمكن فصل Nitraria retusa عن باقى النباتات قيد الدراسة حيث انها لا تحتوى على بقع اسكلرانشيمية فى انسجة كلا من الساق والعنق كما انها تنفرد بوجود خلايا مخاطية  فى انسجة  كلا من الساق و العنق والنصل. الامداد الوعائى للعنق عبارة عن حزمة واحدة ولا تحتوى على اى نتوئات. وعند دراسة الامدادات الوعائية للازهار كان اهم ما يميز Nitraria retusa هو ان كل سبلة لها حزمة وعائية وحيدة وتتجزأ بداخلها. وايضا  الترتيب الغير تقليدى لحزم الاسدية الوعائية حيث ان حزم الاسدية التى  توجد فى المحيط الخارجى للزهرة تقابل البتلات  بينما الحزم  التى  توجد فى المحيط الداخلي للزهرة تقابل السبلات. وقد توافق هذا مع ما تم رصدة فى دراسات سابقة.

 (Sheahan & Cutler, 1993 and Ronse Decraene et al., 1996). 

 

  ثانيا: الدراسة الكيميائية

 

تتضمن فصل وتعريف المحتوى الفلافونيدى للخلاصات الكحولية لنبات Nitraria retusa باستخدام الطرق الكيميائية مثل التميؤ الحمضي الكلى والجزئى والإنزيمي وكذلك بالطرق الفيزيائية المختلفة مثل طيف الأشعة فوق البنفسجية والرنين النووي المغناطيسي.

 

*الفصل والتعريف:

            

تم استخلاص نبات النيترايا موضوع الدراسة باستخدام 50% ، 70% كحول ميثيلى ثم تم تمرير المستخلص الكحولي بعد تركيزه على عمود كروماتوجرافى المحتوى على مادة البولى أميد باستخدام مخلوط من الماء والكحول الإيثيلى بنسب مختلفة – كما تم استخدام الورق  الكروماتوجرافى فى فصل المركبات فى صورة نقية.

 

*إستنباط البنية الكيميائية للمركبات وتعريفها:

 

وقد تم فصل اثنى عشر مركبا من نبات Nitraria retusa منها خمسة مركبات لم تفصل منها من قبل وهى :

Apigenin 6,8di-C--glucopyranoside and apigenin 6-C--arabino-pyranoside-8-C--glucopyranoside, luteolin-7-O--glucopyranoside, luteolin-7-O--xylosyl--glucopyranoside and isorhamnetin-3-O--rhamnopyranoside-7-O--glucopyranoside            

ومركب واحد فصل لاول مرة فى الطبيعة وهو:

kaempferol-3-O--xylosyl-(1→ 2)-[O-α-rhamnopyranosyl-(1→ 6)]-O-β-galactopyranoside

وعند دراسة وجود تلك المركبات فى باقى النباتات قيد الدراسة باستخدام التحليل الكروماتوجرافى العالى فى السوائل ومقارنة تلك النتائج بما تم فصلة من قبل فى دراسات سابقة وجد ان Nitraria retusa تتميز بوجود خمسة مركبات لا توجد فى باقى النباتات قيد الدراسة وهى :

Apigenin 6,8di-C--glucopyranoside, apigenin 6-C--arab-inopyranoside-8-C--glucopyranoside, luteolin-7-O--xylo-syl--glucopyranoside and isorhamnetin-3-O--rhamno-pyranoside-7-O--glucopyranoside and kaempferol-3-O--xylosyl-(1→ 2)-[O-α-rhamnopyranosyl-(1→ 6)]-O-β-galacto-pyranoside.

 

ثالثا: التحليل الاحصائى

 

يتضمن هذا الجزء من الدراسة  وضع جميع صفات الدلائل المظهرية والتشريحية والكيميائية (200 حالة صفة) لعدد 5 وحدات تصنيفية فى جداول واخضاعها لبرنامج التحليل الاحصائى(Minitab Inc, 1999).

وكانت نتيجة هذا التحليل هو انفصال الوحدات المدروسة الى مسلسلين(Series) احدهما يحتوى على  النتراريا ريتوزا والاخر يحتوى على  باقى النباتات والذى بدورة ينقسم الى تحت مسلسلين(Subseries) وعنقودين (Clusters) ومجموعتين ((Groups حيث اوضحت الشجرة التصنيفية (Dendrogram) العلاقات البينية للوحدات المدروسة عن طريق تحديد درجات التشابة والاختلاف. وقد ادى هذا التحليل الى ترجيح فصل Nitraria retusa الى فصيلة منفصلة عن الفصيلة الزيجوفيلية.

 

 

وفيما يلى اهم النقاط المرجحة لفصل  Nitraria retusa عن الفصيلة الزيجوفيلية  والتى تم استخلاصها من الرسالة قيد الدراسة:

 

1-   Nitraria retusa شجيرات شوكية وذات سوق عديدة.

2-   الاذينات متساقطة والاوراق بسيطة ومسننة القمة.

3-   وجود طبقة شمعية على الطبقة الفوق كيتية لسطح البذرة.

4-   الازهار مقنبة والثمار حسلية و تؤكل.

5-   لا تحتوى على بقع اسكلرانشيمية فى كلا من الساق والعنق.

6-   وجود خلايا مخاطية الافراز فى انسجة  كلا من الساق و العنق والنصل.

7-   الامداد الوعائى للعنق عبارة عن حزمة واحدة ولا تحتوى على اى نتوئات وبعد انفصال حزمة القنابة تتميز الحزمة الوعائيه الرئيسية الى خمسة حزم سيبلية منفصلة وخمسة حزم بتلية منفصلة وخمسة عشرحزم اسدية دون وجود اى تعقيدات (Complex).

8-   الحزم السبلية تتفرع وتتجزأ داخل انسجة السبلات (Dependant vascular supply).

9-   الترتيب الغير تقليدى لحزم الاسدية الوعائية حيث ان حزم الاسدية التى  توجد فى المحيط الخارجى للزهرة تقابل البتلات  بينما الحزم  التى  توجد فى المحيط الداخلي للزهرة تقابل السبلات.

10- تتميز Nitraria retusa بوجود كلا من

      Apigenin 6,8di-C--glucopyranoside, apigenin 6-C--arab-inopyranoside-8-C--glucopyrano-side, luteolin-7-O--xylosyl--glucopyranoside and isorhamnetin-3-O--rhamnopyranoside-7-O--glucopyranoside and kaempferol-3-O--xylosyl-(1→ 2)-[O-α-rhamnopyranosyl-(1→ 6)]-O-β-galactopyranoside."